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来源:《分析化学》2016年第01期  作者:江涛;马良;张宇昊;王佳曼;
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光谱法研究黄曲霉毒素B_1与人血清白蛋白的结合反应

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黄曲霉毒素B_1(AFB_1)是目前发现的致癌能力最强的真菌毒素,严重危害人畜健康。人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)在结合、运输内源性和外源性等小分子物质方面具有重要的生理功能。研究AFB_1与HSA的相互作用机理和作用过程,在分子毒理学上具有重要意义。本研究模拟在人体血液pH条件(pH 7.4,离子强度0.1 mol/L),通过荧光淬灭、3D荧光法和圆二色谱(Circular dichroism,CD)等光谱方法研究AFB_1与人血清蛋白的相互作用。结果表明,AFB_1与HSA的内源荧光淬灭属于静态淬灭,AFB_1-HSA在298,303,308和313 K4个温度条件下,结合常数均为10~4数量级,结合位点都约为1。根据Van't Hoff方程AFB_1-HSA体系是熵增焓减的自发过程,分子间主要作用力为疏水作用和氢键。基于Forster's能量转移,得知AFB_1与HSA结合距离为3.31 nm。竞争结合实验表明,AFB_1结合在HSA的siteI位点上,靠近色氨酸Trp-214。通过3D荧光分析,AFB_1的结合作用导致了HSA氨基酸残基微环境和二(本文共计7页)......[继续阅读本文]

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