来源:《光机电信息》2002年第03期  作者:
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观察活体细胞的多光子荧光显微镜

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一种能对活体细胞实时观察的多光子荧光显微镜最近由日本大阪大学研究生院和横河电机公司联合推出。利用这种多光子显微镜,通过对试样照射高密度的光,使通常只吸收一个光子的电子能吸收两个以上的光子而产生荧光,以此实施观察。可见光显微镜可以是紫外光显微镜,也可以是红外光显微镜。且由于多光子吸收只在激光聚焦焦点处产生,若使用强透射性近红外光照射,还可使生物体的深处图像化。多光子显微镜采用了近红外飞秒脉冲激光,为了快速而实时地观察试样,采用了快速扫描微透镜阵列。所采用的激光器是平均输出约10mW的钛蓝宝石激光器,峰值输出为1.25kW,在80MHz可产生10fs的脉冲,观察深度为250μm~300μm。微透镜阵列以1800rpm旋转,同时扫描形成单光束的20个~1000个光点,仅用3ms便可获取一张图像。这样,不仅激光照射的时间极短,且与连续振荡激光相比,光子吸收几率大幅度提高,可对试样进行实时无损观察。在实验中,对摘出的表面凸起的心脏导入荧光Ca2+指示剂,观察了促使心肌运动的信息传递物质-Ca2+的浓度波。进而,利用多光子显微镜对细胞进行加工,并施加活细胞外部刺激。而过去这种实验只能用化学物质和玻(本文共计2页)......[继续阅读本文]

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