来源:《昆明医科大学学报》2018年第03期  作者:白刚;张洪钿;赖军;罗林;左频;范耀东;
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NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤后的神经再生修复

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目的 NT-3-HUMSCs联合基因沉默SOCS3治疗SD大鼠脊髓损伤,以期促进损伤神经再生修复.方法 (1)用贴壁法体外培养人脐带间充质细胞(HUMSC),同时进行分离,提纯和鉴定;(2)构建NT-3基因真核表达载体,利用基因转染技术将其转入HUMSC,构建NT-3-HUMSC细胞,体外检测其存活情况及NT-3表达情况;(3)筛选作用于SOCS3的特异性靶点,进行序列同源性分析,设立阴性对照,设计并合成SOCS3-siRNA,同时在体外检测功能;(4)建立SD大鼠脊髓损伤模型分为为:I.假手术组10只;Ⅱ.T12全脊髓横断损伤模型40只,随机分为4组,生理盐水治疗组10只;siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组10只;NT-3-HUMSCs治疗组10只;SOCS3-siRNA治疗组10只.以上各组造模成功后,分别存活12周进行神经电生理监测;(5)对SD大鼠进行灌注固定和取材,观察局部胶质疤痕降解情况和轴突再生情况,同时运用生物素化葡聚糖(BDA)荧光顺行追踪取损伤移植区-宿主交界处头尾侧脊髓组织,镜下观察皮质脊髓束再生的情况.结果(1)siRNA+NT-3-HUMSCs治疗组较生(本文共计7页)......[继续阅读本文]

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