来源:《上海医学检验杂志》1997年第02期  作者:李金钟,段雄波,相青珍,赵卿,李兰平
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磷酸对硝基苯酚法测定细菌硷性磷酸酶

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细菌破性磷酸酶(ALP)的检测多采用磷酸酚酞球脂平血法[1,2],此法操作繁琐,且需18~24h才能获得结果,在实验室常规应用受很大限制.为寻找一种简便、快速而准确的方法,我们依据有关文献[3]建立了以磷酸对硝基本酚(4-NPP)为ALP基质的快速微量法(下称4-NPP法),并与手血法进行了对照测定。材料和方法一、参考苗株 金黄色葡萄球菌(26003,ALP阳性)由中国药品生物制品检定所提供,松鼠葡萄球菌(2438,ALP弱阳性)和后生葡萄球菌(ALP阴性)由本室分离.松鼠葡萄球菌经中国医学细菌保成管理中心复核鉴定.二、实验菌株 金黄色葡萄球菌50株、表皮葡萄球菌30株、后生葡萄球菌20株、木相葡萄球菌10株、孔氏葡萄球菌和中间型葡萄球菌各5株,共计120株.均为本室保存菌种,实验前重新复核鉴定。三、平见法按文献[1,2]操作。四、4NPP法1.AnP基质缓冲液A液为2mol/L乙二醇胶缓冲液,每50ml含乙二醇肢10ml、MgCI:·6H刀102mg,用浓盐酸约1.95ml调pH至10.coB液为30mmol/L4-NPP。临用前将A、B等量混合。2.方法用接种环挑取数个待检菌落,混(本文共计1页)......[继续阅读本文]

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