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来源:《食品科学》2010年第13期  作者:翟一凡;向军俭;唐勇;郭常伟;刘小锋;杨红宇;
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重金属铅多克隆抗体的制备及鉴定

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目的:合成铅离子完全抗原,并对其进行鉴定;用合成的完全抗原免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定效价和特异性。方法:用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Pb2+与载体蛋白BSA和OVA偶联在一起,合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA),并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP)检测抗原中Pb2+含量,以及通过免疫Balb/c小鼠,采集血清进行间接ELISA和竞争ELISA检测。结果:两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后,紫外吸收峰偏移等现象;免疫的4号和5号Balb/c小鼠的抗血清效价达1:400000;与OVA无交叉反应,ELISA检测IC50值为1.5ng/mL,与Fe3+有近5%的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于1%。结论:铅离子多克隆抗体制备成功。(本文共计4页)......[继续阅读本文]

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