来源:《时珍国医国药》2015年第03期  作者:王晓丽;张旭;王晓多;
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金樱子ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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《中国药典》规定金樱子为蔷薇科植物金樱子Rosa laevigataMichx.的干燥成熟果实。金樱子是黔产大宗中药材之一,具较高的药用价值,能补肾益气、涩精缩尿、止泻,用于遗精滑精、遗尿尿频等;现代药理研究表明,金樱子可降低血清胆固醇含量,可使肠壁之粘膜收缩,分泌减少而有止泻作用,并具明显的抗菌及抗病毒作用。ISSR是基于PCR的一种分子标记技术,其扩增结果容易受Mg2+、引物、d NTPs、Taq DNA聚合酶、模板DNA等浓度的影响。为了获得稳定可靠的试验结果,本研究运用正交试验设计,通过部分试验,找到和建立优化的水平组合,为金樱子构建ISSR研究遗传多态性等奠定基础[1,2]。1材料与仪器1.1供试样品于2012年,采集于贵州境内的新鲜金樱子植物,经贵阳医学院生药学教研室鉴定为金樱子Rosa laevigata Michx.1.2试剂Taq酶,PCR相关试剂均购自上海生物工程有限公司,引物由上海生物工程有限公司合成,其他生化类和有机试剂均由华美生物工程公司提供。1.3仪器低温高速离心机(BECKMAN,GS-15R);紫外-可见光分光度计(上海分析仪器厂);凝胶成像仪(UVP,(本文共计2页)......[继续阅读本文]

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