来源:《时珍国医国药》2015年第10期  作者:焦方文;王集会;邹龑;张盼盼;刘玉红;王俊香;
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全蝎粉酶解工艺最佳用酶的初步筛选

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全蝎为钳蝎科动物东亚钳蝎Buthus martensii Karsch的干燥体,辛、平,有毒。具有熄风镇痉、攻毒散结、通络止痛之功效[1]。据国内临床研究报道,目前抗癌药的成方中,全蝎常为主药,由于有效成分不清楚,多以原粉入药。目前研究较多的是蝎毒成分,据研究报道Liu等[2]从蝎毒中分离纯化出一种抗肿瘤多肽(ANTP),对S-180小鼠纤维肉瘤和小鼠艾氏腹水瘤的抑瘤效果较好。将全蝎粉酶解后,全蝎难溶性硬蛋白有可能转化为可溶性的寡肽等成分,本来可溶性的部分大分子蛋白质也可能被分解为多肽和氨基酸,从而容易被人体吸收[3]。本文以全蝎冻干粉为底物,采用4种蛋白酶进行水解,同时以水提全蝎粉作为对照组,测定每种蛋白酶的水解度,水解液冷冻干燥后,配制系列浓度,以对肺腺癌A549细胞的抑制率为指标,对四种蛋白酶进行筛选,初步确定最佳用酶。1材料1.1样品、试剂与仪器全蝎冻干粉自制(批号:20140701);胃蛋白酶、胰蛋白酶、甘氨酸(国药集团化学试剂有限公司);胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶(上海源叶生物科技有限公司);改良型RP-MI-1640培养基、胎牛血清(赛默飞世尔生物制品北京有限公司);胰酶((本文共计2页)......[继续阅读本文]

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