桑叶f3h基因PCR克隆与分析
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分享目的克隆桑叶f3h基因并进行测序分析。方法选定了该基因的PCR扩增的上游引物为GTCCGAGACGAAGACGAG,下游引物为CTTGTACATCTCGGTGTA,PCR反应体系为95℃预变性2min→变性95℃15sec、退火58℃5sec、延伸72℃15sec(30个循环)→延伸72℃2min→4℃结束。并对克隆得到的片段进行分析。结果克隆出长度为515bP的片段,通过NCBI网站的ORF Finder找到开放式阅读框为345bp,翻译成氨基酸序列为115个氨基酸,理论分子质量为13202.2,等电点为5.43。结果证明本实验所扩增的基因片段为f3h。结论为进一步克隆f3h全长基因及下一步研究该基因的表达调控打下基础。(本文共计2页)......[继续阅读本文]