桑叶f3h基因PCR克隆与分析

桑叶,始载于《神农本草经》,列为中品,谓:叶主“除寒热,出汗”。《中国药典》2015年版一部规定,桑叶来源于桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶[1]。现代研究表明,桑叶在降血脂、降胆固醇、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳等方面的应用前景比较好。药用植物代谢产物含量的高低,是影响中药品质的化学实质。桑叶主要的药理活性成分为黄酮类成分。游元元等发现,桑叶在不同采收期的黄酮类成分含量有较大差异。而黄酮类成分合成途径中有若干关键酶基因。f3h是黄酮类化合物合成途径中的一个关键酶,是花色素苷合成途径中的结构基因。f3h催化形成的二氢黄酮醇是进一步合成黄酮醇和花青素苷的必要前体物质。因此,其催化的步骤是花青素苷合成途径与其它类黄酮物质分支途径的交叉点之一[2]。本研究通过对桑叶f3h基因的克隆研究,得到该基因的片段,为进一步克隆f3h全长基因及下一步研究该基因的表达调控打下基础。。1材料、试剂与仪器1.1材料桑叶采于成都中医药大学温江校区,由成都中医药大学万德光教授鉴定为Morus alba L.。1.2试剂TRNzol总RNA提取试剂,无水乙醇,氯仿,液氮,异丙醇,超纯水,goldvie(本文共计2页)......[继续阅读本文]