来源:《胃肠病学和肝病学杂志》2010年第05期  作者:刘昶;纪艳超;潘尚哈;
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逆转录病毒载体介导人凝血因子Ⅷ在肝细胞中的表达

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目的建立逆转录病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ(FⅧ)鼠肝细胞BRL-3A。方法将一B区缺失(760~1 639 aa)的人FⅧcDNA(FⅧBD cDNA)克隆至逆转录病毒载体pLNCX2,构建重组表达载体pLNCX2-FⅧBD。感染BRL-3A细胞,分别采用一期法、ELISA法检测细胞培养上清中人FⅧ的凝血活性(FⅧ:C)和抗原含量(FⅧ:Ag)。结果 pLNCX2-FⅧBD在鼠肝细胞BRL-3A细胞中获得良好表达,在24 h内每毫升中106细胞表达FⅧ:C为1.12 U,FⅧ:Ag为350 ng。结论逆转录病毒载体能够介导人FⅧ在肝细胞中的表达,为血友病A的基因治疗奠定了基础。(本文共计3页)......[继续阅读本文]

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