来源:《微生物学通报》2001年第04期  作者:黄娟,李家洋
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拟南芥基因组研究进展

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(续上期 )使一个基因完全失活通常是了解其功能的最直接方法。但是 ,在显花植物中还缺乏有效的方法使目的基因置换。于是像反义失活及共抑制等方法就被广泛地应用在使某些已知序列的基因的失活研究方面。但这些策略对大范围使用并不够有效 ,目前仍主要应用在单基因的研究上。最近 ,最为有效的改善措施就是随机大范围插入诱导突变 (RandomLarge scaleIn sertionalMutagenesis) [15 ],T DNA或转座子的插入可导致基因的完全失活。由于插入片段的序列已知 ,用与插入片段末端及感兴趣基因互补的序列为引物 ,即可用多聚酶链式反应 (PCR ,PolymorphismChainReaction)的方法筛选到在感兴趣基因中含有插入序列的突变体。或者可对每一插入序列的两侧进行测序 ,由此直接确定被打断的基因。基因组测序的完成使我们即使只知道插入序列两侧很短的部分也可确定插入在基因组DNA中的确切位置 ,并由此可分析确认被打断的基因 ,而对相应突变体的表型及其他性状的分析就可对被打断基因的功能有了大致了解[2 2 ]。要获得随机插入有两种方法可供使用 :T DNA法[2 3 (本文共计2页)......[继续阅读本文]

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