来源:《中国药学杂志》2014年第12期  作者:邓莹;李明成;张丽华;
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复合聚合酶链反应鉴别龟甲正品与伪品的特征

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目的探讨复合聚合酶链反应(PCR)技术鉴别中药材龟甲真伪的分子标记特征。方法采用盐析法提取龟甲正品及其伪品线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)。从GenBank数据库中下载乌龟mtDNA细胞色素b(cytochrome b,Cyt b)和细胞色素C氧化酶亚基I(cytochrome oxidase subunit I,CoI)的基因序列,用Premier 5.0设计2对特异性引物,建立复合PCR技术对龟甲正品及其伪品进行扩增并测序。结果盐析法提取的龟甲mtDNA的大小均为16.6×103bp,正品龟甲经复合PCR扩增在300~500 bp间有2条明亮分明的条带,而伪品龟甲只出现1条或无条带。结论复合PCR技术鉴别龟甲真伪具有高度特异性、简便、准确、快捷、实用性强,对龟甲类药材的鉴定有很高的应用价值及准确性。(本文共计5页)......[继续阅读本文]

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