来源:《中国中药杂志》2019年第15期  作者:产清云;蒋露;程铭恩;储姗姗;于大庆;谢晋;查良平;彭华胜;
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位点特异性PCR鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无药材

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建立一种鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无的DNA分子标记鉴别方法。通过测序获得延胡索、齿瓣延胡索、夏天无及其近缘种14种共56个样品的mat K,trn G和trn H-psb A序列,利用Bio Edit 7. 2. 2软件比对获得SNP位点,根据变异位点设计AS-PCR鉴别引物,并优化PCR条件,根据特异性条带分别对延胡索、齿瓣延胡索和夏天无进行鉴定。结果显示模板量(0. 6~1 200 ng)和退火温度(42~60℃)对扩增结果影响较小,循环次数对扩增结果影响较大。在循环数为20时,延胡索、齿瓣延胡索和夏天无分别扩出297 bp(mat K)、353 bp(trn G)和544 bp(mat K)的特异性条带。该研究所建立的方法对延胡索的最低检测限为6 ng,对夏天无的最低检测限为60 ng,齿瓣延胡索低于0. 6 ng。该文所建立的位点特异性PCR法能特异性鉴别延胡索、齿瓣延胡索和夏天无。(本文共计7页)......[继续阅读本文]

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