来源:《中国农业科学》1999年第05期  作者:田苗英,吴茂森,陈彩层,肖红,成卓敏
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大麦黄矮病毒缺失复制酶基因植物表达载体的构建及转基因小麦的获得

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以大麦黄矮病毒GPV 株系的RNA 为模板, 采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,扩增出1134bp 的缺失复制酶基因。将扩增的片段克隆到pUC19 的Sm aI位点上并进行了序列测定,获得正向插入的重组质粒pUC19D。以KpnI和XbaI从pUC19D 上切下此基因并插入质粒pEm u-m cs-N 得到植物表达载体pPPI8。应用花粉管通道法转化普通小麦品种陇鉴127、陕160 和晋麦47,通过卡那霉素抗性筛选、PCR和PCR-Southern 检测,3 个品种均获得了转基因小麦植株。(本文共计6页)......[继续阅读本文]

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