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来源:《饲料广角》2005年第05期  作者:索德成,杨曙明,施文娟
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酶解法测定L-抗坏血酸磷酸酯含量的研究

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L-抗坏血酸磷酸酯是将抗坏血酸中的不稳定基团(在烯醇上的氢)与磷酸盐进行酯化反应,生成的稳定酯类化合物。从根本上解决了抗坏血酸不稳定、易氧化的问题。动物消化道内存在的磷酸酶能将其酶解,释放出抗坏血酸为动物利用,是一种可替代抗坏血酸的饲料添加剂。目前已经报导的测定L-抗坏血酸磷酸酯含量的方法有紫外法和高效液相色谱法两种。紫外法方法简易,但由于一些干扰物质的存在,分辨能力差;高效液相色谱法虽然能够通过色谱分离出干扰物质,但成本较高,不能得到广泛的应用。我们在大量实验的基础上,研究了植酸酶测定L-抗坏血酸磷酸酯含量的方法,即酶解法。酶解法的基本原理是:在酸性条件下,植酸酶可将L-抗坏血酸磷酸酯水解为L-抗坏血酸,用2,6-二氯靛酚钠溶液滴定L-抗坏血酸含量。酶解法的关键是酶解条件,他直接影响测定结果的准确性,为此我们对酶解条件进行了进一步的研究。1酶解条件的选择1.1温度的选择根据文献可知,植酸酶在37℃左右酶活性最高,因此我们采用37℃做为酶解法的温度条件。1.2溶液条件的选择由于L-抗坏血酸磷酸酯易溶于酸中,所以采用乙酸溶液做为提取液和酶解反应液。通过以下实验确定溶液浓度。在5个小烧杯中(本文共计2页)......[继续阅读本文]

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