来源:《中华眼科杂志》2006年第12期  作者:柳夏林;李拥军;刘奕志;葛坚;
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低氧培养的人视网膜神经胶质细胞对血管内皮前体细胞的作用

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目的探讨低氧环境下视网膜神经胶质细胞介导的低氧反应分子通路对血管内皮前体细胞(EPCs)的作用及其机制。方法人外周血循环EPCs(CD34+、CD33+双标阳性细胞)经荧光免疫激活流式细胞仪分选收集后培养;分别使用低氧(5%O2,实验组)和正常氧(20%O2,对照组)的人视网膜神经胶质细胞生长培养液作为条件培养液,多次处理EPCs,检测和分析EPCs的增殖活性(WST-1比色法)和分化能力(免疫荧光染色法);采用酶联免疫吸附试验检测实验组和对照组视网膜神经胶质细胞血管内皮生长因子(VEGF)的释放量,采用免疫印迹法检测细胞核内低氧反应因子(HIF)-1α的表达。结果实验组EPCs的增殖活性(吸光度值为1·53±0·10)和分化能力[细胞数目为(29±5)个]均较对照组增殖活性(吸光度值为0·88±0·25)和分化能力[细胞数目为(18±8)个]明显增强(P<0·05)。实验组培养6、24h后神经胶质细胞核内均可检测到HIF-1α表达,而对照组表达缺失。实验组视网膜神经胶质细胞VEGF的释放量较对照组明显增加,且具有时相性,培养24h实验组VEGF的释放量[(319·16±34·12)p(本文共计6页)......[继续阅读本文]

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