盐酸小檗碱对肝星状细胞自噬和凋亡的影响

张建;赵红伟;胡义亭;张大雷;高俊茶;郑吉敏;王玉珍

目的研究盐酸小檗碱对肝星状细胞(HSCs)自噬和凋亡的影响。方法取指数生长期HSCLX2细胞,实验分组:溶剂对照组(1‰DMSO)、盐酸小檗碱5μg/ml组、盐酸小檗碱10μg/ml组和盐酸小檗碱20μg/ml组。盐酸小檗碱干预24 h。流式细胞术检测细胞凋亡、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)阳性细胞荧光强度。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Caspase-3、与Bcl-2相互作用的肌球蛋白样卷曲螺旋蛋白1(Beclin1)、自噬相关基因5(Atg5)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)mRNA的表达,Western blotting检测Beclin1、Atg5、Akt、p-Akt、JNK及p-JNK蛋白的表达。结果与溶剂对照组比较,不同盐酸小檗碱浓度干预组HSC-LX2凋亡增加(P <0.05),Caspase-3mRNA表达增加(P <0.05),Caspase-3阳性细胞荧光强度及蛋白活性升高(P <0.05);Beclin1、Atg5 mRNA及蛋白水平下降(P <0.05);Akt、JNK mRNA水平下降(P <0.05),Akt、p-Akt、JNK、p-JNK蛋白水平下降(P <0.05)。结论盐酸小檗碱可能通过抑制Akt信号通路促进凋亡,通过抑制JNK信号传导途径抑制自噬。 (共8页)
PDF全文下载 订阅本刊

安装知网阅读App
手机 · Pad同步看

开通季卡/年卡,优惠更多
立即开通